Руководство уже более 50 лет является стандартом по лабораторной гематологии в США и Западной Европе. Авторы подробно описывают методики лабораторного обследования больных с заболеваниями крови и интерпретацию полученных результатов, принципы организации и управления работой гематологической лаборатории, а также освещают вопросы контроля за качеством проводимых исследований.
Руководство может служить настольной книгой для заведующих лабораториями, врачей-гематологов, лаборантов, а также справочником по качественной лабораторной практике для руководящего звена учреждений здравоохранения.
Авторы
Предисловие к изданию на русском языке
Предисловие к изданию на английском языке
Список сокращений
От редакции
Глава 1. Забор и обработка крови
Предупреждение биологического риска
Стандартизированная методика
Венозная кровь
Капиллярная кровь
Различия между капиллярной и венозной кровью
Сыворотка
Антикоагулянты
Влияние хранения на результаты анализов крови
Влияние хранения на морфологию клеток крови
Однородность образца
Список литературы
Глава 2. Относительные величины и нормальные значения
Относительные нормальные величины
Методика статистических расчетов
Нормальные относительные величины
Физиологические изменения гематологических показателей
Список литературы
Глава 3. Основные методы исследования крови
Измерение уровня гемоглобина
Измерение уровня гемоглобина при помощи спектрометра (спектрофотометра)
или фотоэлектрокалориметра
Гемоглобинцианидный (циангемоглобиновый) метод
Оксигемоглобиновый метод
Прямая спектрометрия
Прямое считывание с портативных гемоглобинометров
Гематокритное число, или гематокрит
Микрогематокритный метод
Эталонная методика, рекомендованная Международным советом по стандартизации в гематологии
Подсчет вручную клеток крови и эритроцитарных индексов
Подсчет базофилов и эозинофилов
Ручной подсчет лейкоцитарной формулы
Подсчет тромбоцитов
Подсчет ретикулоцитов
Автоматизированные приборы для подсчета клеток крови
Концентрация гемоглобина
Подсчет эритроцитов
Системы подсчета
Достоверность показателей электронных счетных устройств
Гематокрит и средний объем эритроцита
Эритроцитарные индексы
Изменение объема эритроцитов: ширина распределения эритроцитов по объему
Изменение насыщения эритроцитов гемоглобином: ширина распределения гемоглобина в эритроците
Подсчет общего количества лейкоцитов
Автоматизированный подсчет лейкоцитарной формулы
Графики автоматизированных приборов
Подсчет тромбоцитов
Подсчет ретикулоцитов
Калибровка приборов для автоматического подсчета клеток крови
Система предупреждения в приборах для автоматизированного подсчета клеток крови
Список литературы
Глава 4. Изготовление и методы окрашивания мазков крови и костного мозга
Изготовление мазков крови на предметных стеклах
Окрашивание мазков крови и костного мозга
Методы окрашивания
Исследование нативных препаратов крови
Методы концентрирования и разделения клеток крови
Паразиты, определяемые в крови, костном мозге или аспирате селезенки
Исследование мазков крови для выявления паразитов
Окрашивание тонких мазков для выявления паразитов
Малярия
Лейшманиоз
Трипаносомоз
Филяриоз и лоаоз
Бабезиоз
Эрлихиоз
Список литературы
Глава 5. Морфология клеток крови в норме и при патологии
Изучение мазков крови
Морфология эритроцитов
Нарушение эритропоэза
Нарушение синтеза гемоглобина
Повреждение эритроцитов после их созревания
Игольчатые эритроциты и фрагментация красных клеток
Другие нарушения эритроцитов
Изменения, связанные с компенсаторным усилением эритропоэза
Эффекты спленэктомии и гипоспленизма
Сканирующая электронная микроскопия
Морфология лейкоцитов
Полиморфно-ядерные лейкоциты
Эозинофилы
Базофилы
Моноциты
Лимфоциты
Морфология тромбоцитов
Список литературы
Глава 6. Биопсия костного мозга
Аспирация костного мозга
Аспирация костного мозга у детей
Пункционные иглы
Обработка исследуемого материала
Исследование пунктата костного мозга
Оформление результатов исследования мазка костного мозга
Приготовление среза из аспирированного образца костного мозга
Чрескожная трепанобиопсия костного мозга
Список литературы
Глава 7. Железодефицитная анемия и избыток железа
Метаболизм железа
Содержание железа в организме
Нарушения обмена железа
Методы оценки содержания железа
Сывороточный ферритин
Иммунологическое выявление ферритина
Оценка концентрации железа в сыворотке
Альтернативный метод: оценка сывороточного железа без преципитации белков
Концентрация сывороточного железа в норме и при патологии
Железосвязывающая способность, сывороточный трансферрин, насыщенность трансферрина железом
Определение остаточной железосвязывающей способности
Сывороточный трансферрин
Насыщенность трансферрином
Сывороточные трансферриновые рецепторы
Эритроцитарный протопорфирин
Методологическая и биологическая вариабельность анализов
Прогностическая значимость показателей метаболизма железа
Заключение
Список литературы
Глава 8. Исследование при мегалобластной анемии - обмен кобаламина, фолиевой кислоты и их метаболитов
Гематологические характеристики мегалобластной анемии
Обследование пациентов с подозрением на дефицит витамина B12 или фолата
Методики определения содержания витамина B12 и фолата
Пробы на конкурентное связывание с белками
Серологические пробы на витамин B12
Методики определения содержания фолата в сыворотке
Методики определения уровня фолата в эритроцитах
Метаболическое исследование путей превращения кобаламина и фолата
Определение содержания метилмалоновой кислоты
Определение содержания гомоцистеина
Определение количества антител к внутреннему фактору
Исследование всасывания витамина B12
Экскреция с мочой витамина B12 (проба Шиллинга)
B12-связывающая способность сыворотки или плазмы: измерение уровня транскобаламина
Латентная связывающая способность витамина B12, качественное и количественное
определение транскобаламина
Голотранскобаламиновые пробы
Благодарность
Список литературы
Глава 9. Лабораторные методы исследования для диагностики гемолитических анемий
Исследование для выявления гемолитической анемии
Гемоглобин плазмы
Гаптоглобин сыворотки
Гемопексин сыворотки
Исследование плазмы (или сыворотки) на метгемальбумин
Обнаружение гемосидерина в моче
Химические исследования катаболизма гемоглобина
Порфирины
Аномальные пигменты гемоглобина
Список литературы
Глава 10. Исследования при врожденных гемолитических анемиях: аномалии мембраны
и ферментов эритроцитов
Исследование дефектов мембраны
Определение осмотической резистентности путем лизиса в гипотоническом растворе
Проточная цитометрия окрашенных клеток
Пробы на время лизиса под действием глицерина
Криогемолиз
Аутогемолиз
Анализ белков мембраны
Определение дефицита ферментов при врожденных гемолитических анемиях
Проба на восстановление метгемоглобина
Цитохимические пробы, позволяющие определить дефект метаболизма эритроцитов
Скрининг-тест на пиримидин-5'-нуклеотидазу
Проба на пируваткиназу
Количественная оценка восстановленного глутатиона
2,3-Дифосфоглицерат
Кривая диссоциации кислорода
Список литературы
Глава 11. Приобретенные гемолитические анемии
Оценка вероятности приобретенной гемолитической анемии у пациента
Изучение мазков крови и подсчет клеток при подозрении на приобретенную гемолитическую анемию
Иммунные гемолитические анемии
Гемолитическая анемия вследствие воздействия окислителей
Микроангиопатическая и механическая гемолитические анемии
Пароксизмальная ночная гемоглобинурия
Список литературы
Глава 12. Исследование при наличии патологических гемоглобинов и талассемии
Молекула гемоглобина
Структурные формы гемоглобина
Синдромы талассемии
Обследование пациентов с подозрением на гемоглобинопатию
Лабораторное определение форм гемоглобина
Тесты для определения гемоглобина S
Неонатальный скрининг
Определение нестабильных гемоглобинов
Определение гемоглобина Ms
Определение гемоглобинов с нарушенной аффинностью
Дифференциальная диагностика наиболее распространенных форм гемоглобина
Обследование при подозрении на талассемию
Количественное определение гемоглобина A2
Интерпретация значений гемоглобина A2
Количественное определение гемоглобина F
Оценка внутриклеточного распределения гемоглобина F
Оценка состояния обмена железа при талассемии
Эритроцитарные включения
Пренатальная диагностика генных нарушений глобина
Список литературы
Глава 13. Цитохимическое исследование эритроцитов и лейкоцитов
Цитохимическое исследование эритроцитов
Цитохимическое исследование лейкоцитов
Список литературы
Глава 14. Иммунофенотипирование
Введение
Методы изучения иммунологических маркеров
Список литературы
Глава 15. Диагностические радиоизотопы в гематологии
Источники радиоизотопов
Радиационная защита
Объем крови
Кинетика железа
Оценка продолжительности жизни эритроцитов in vivo
Проба на совместимость
Визуализация селезенки при помощи сцинтилляционного сканирования
Определение кровопотери через пищеварительный тракт
Определение продолжительности жизни тромбоцитов
Список литературы
Глава 16. Исследование гемостаза
Компоненты нормального гемостаза
Основные подходы к исследованию гемостаза
Оборудование для лабораторного анализа
Преаналитические переменные: забор крови и приготовление образцов
Коагулограмма
Интерпретация результатов тестов первого ряда
Тесты второго ряда
Обследование при кровотечениях, связанных с дефицитом или дефектом факторов свертывания
Обследование пациента на наличие циркулирующего ингибитора свертывания крови
Обследование пациента с предполагаемой афибриногенемией, гипофибриногенемией
или дисфибриногенемией
Дефекты первичного гемостаза
Исследование при предполагаемой болезни Виллебранда
Исследование при подозрении на наследственное или приобретенное нарушение функций тромбоцитов
Тест растворимости сгустка для определения фактора XIII
Синдром диссеминированного внутрисосудистого свертывания крови
Обследование носителей врожденного дефицита или дефекта системы гемостаза
Список литературы
Глава 17. Выявление склонности к тромбообразованию
Представление о тромбофилии
Выявление волчаночного антикоагулянта
Исследования при наследственных тромботических состояниях
Исследование дефицита протеина С и S
Фибринолитическая система
"Гиперактивность" и активация тромбоцитов
Гомоцистеин
Маркеры активации системы свертывания
Активированный фактор VIIа
Общая оценка системы свертывания
Список литературы
Глава 18. Лабораторный контроль антикоагулянтной, тромболитической и антиагрегантной терапии
Лечение непрямыми антикоагулянтами
Стандартизация тромбопластинов
Лечение гепарином натрия
Тромболитическое лечение
Антитромбоцитарное (антиагрегантное) лечение
Список литературы
Глава 19. Антигены клеток крови и антитела к ним: эритроциты, тромбоциты и гранулоциты
Эритроциты
Тромбоциты и гранулоциты
Список литературы
Глава 20. Лабораторные аспекты гемотрансфузии
Последние разработки в гемотрансфузиологии
Предтрансфузионные этапы определения совместимости
Определение групп крови по системе АВ0 и D
Скрининг антител
Непрямая антиглобулиновая методика
Идентификация антител
Подбор и трансфузия эритроцитарной массы
Перекрестная проба на совместимость крови
Экстренный подбор крови
Антенатальная серология и гемолитическая болезнь новорожденных
Исследование совместимости в особых трансфузиологических ситуациях
Лабораторный анализ трансфузионных реакций
Список литературы
Глава 21. Молекулярный и цитогенетический анализ
Представление об анализе ДНК
Выделение ДНК
Полимеразная цепная реакция
Анализ продуктов полимеразной цепной реакции
Исследование гемоглобинопатий
Нарушения свертывающей системы
Лейкоз и лимфома
Исследование химеризма "хозяин-донор"
Дефицит глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы
Приложения: техническое описание методик
Словарь
Список литературы
Глава 22. Прочие методы
Исследования реакций острой фазы
Гетерофильные антитела в сыворотке: диагностика инфекционного мононуклеоза
Эритропоэтин
Дополнительные тесты на малярию
Список литературы
Глава 23. Подходы к диагностике и классификации заболеваний крови
Общие проявления гематологических заболеваний
Первичные скрининг-тесты
Специфические тесты на часто встречающиеся заболевания крови
Прочие заболевания
Классификация онкологических заболеваний крови
Список литературы
Глава 24. Организация и управление лабораторией
Структура и функции управления
Достоверность исследования
Выбор исследования
Оборудование
Обработка данных
Преданалитический и постаналитический этапы исследования
Аудит и аккредитация лаборатории
Международные стандарты работы
Сравнительный анализ
Список литературы
Глава 25. Техника безопасности при работе в лаборатории
Биологически опасные образцы
Утилизация отходов
Транспортировка образцов
Список литературы
Глава 26. Обеспечение качества
Эталонные препараты
Материалы для контроля качества
Анализ данных
Внешняя оценка качества
Протокол обеспечения качества работы диагностических лабораторий
Список литературы
Глава 27. Гематологические исследования в лабораториях с ограниченными ресурсами
Введение: типы лабораторий
Организация клинико-лабораторного обслуживания
Доступность исследований на каждом уровне
Важнейшие гематологические тесты
Поддержание качества и достоверности исследований
Основные гематологические тесты
Лабораторное обеспечение терапии ВИЧ/СПИДа: количество
CD4-положительных Т-клеток
Управление лабораторией
Список литературы
Приложение
Приготовление основных часто применяемых реактивов, антикоагулянтов и консервирующих
растворов
Буферы
Реактивы
Эталонные стандарты и реактивы
Подготовка стеклянного оборудования
Размеры пробирок
Скорость центрифугирования
Единицы массы и другие единицы измерения, часто применяемые в гематологии
Атомный вес и молекулярная концентрация
Дозы ионизирующего излучения
Статистические анализы
Анализ ANOVA
Автоматические (механические) пипетки
Аппараты для автоматического разведения
Микроскопия
Плановое обслуживание микроскопа
Дефибринирование крови
Список литературы
Указатель